تعیین غلظت و خلوص با دستگاه اسپکت

[vc_row][vc_column width=”2/3″][vc_column_text]

برای تعیین غلظت DNA از دو روش استفاده می کنند:

• روش الکتروفورز
• روش اسپکتوفتومتری

[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/3″][/vc_column][/vc_row][vc_row][vc_column stretch=”1″][us_page_block id=”13722″][/vc_column][/vc_row][vc_row][vc_column width=”2/3″][us_message color=”yellow” icon=”fas|dna” css=”%7B%22default%22%3A%7B%22background-color%22%3A%22_content_overlay%22%7D%7D”]روش الکتروفورز

[/us_message][vc_column_text]

در این روش نمونه DNA ی استخراج شده را همراه با شناساگرهایی که غلظت آنها مشخص است الکتروفورز کرده و با مقایسه باندهای ایجاد شده مربوطه به DNA استخراج شده با باندشناساگر می توان به طور کیفی مقدار DNA  را تعیین کرد. پس مقادیر دی‌ان‌ای را می‌توان کمّی کرد. به این منظور ابتدا از طریق آنزیم محدودکننده برش ایجاد می‌شود. سپس نمونه وارد ژل آگارز می‌گردد. پس از رنگ آمیزی آن با اتیدیوم بروماید یا رنگ‌های دیگر و مقایسه شدت باند دی‌ان‌ای با یک دی‌ان‌ای با غلظت معلوم می‌توان به مقدار کمی دی‌ان‌ای دست یافت

استفاده از شناساگر دی فنیل آمین(DPA)، می‌توان وجود دی‌ان‌ای را تأیید کرد.

[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/3″][us_separator size=”custom” height=”5rem”][us_image image=”13476″ align=”center”][/vc_column][/vc_row][vc_row][vc_column width=”2/3″][us_message color=”yellow” icon=”fas|dna” css=”%7B%22default%22%3A%7B%22background-color%22%3A%22_content_overlay%22%7D%7D”]روش اسپکتوفتومتری

[/us_message][vc_column_text]

همچنین غلظت دی‌ان‌ای را می‌توان با اندازه‌گیری میزان جذب توسط دستگاه اسپکتروفوتومتری  و مقایسه آن با منحنی استاندارد، محاسبه نمود. به منظور اندازه‌گیری خلوص دی‌ان‌ای، میزان جذب محلول حاوی دی‌ان‌ای در طول موج ۲۶۰ و ۲۸۰ نانومتر اندازه‌گیری می‌شود. اگر نسبت خاصی از  جذب در طول موج‌های ۲۶۰ و ۲۸۰ نانومتر برقرار بود می‌توانیم بگوییم نمونه ما فاقد آلودگی پروتئینی است.

در اخر میتوان از طریق PCR و آنالیزهای مختلف DNA استخراج شده مورد آزمایش قرار می گیرد.

[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/3″][us_separator size=”custom” height=”6rem”][us_image image=”13479″ align=”center”][/vc_column][/vc_row]